1. 引言
植物化感作用是指植物之间通过化学物质相互影响(有正向的，也有负向的)的现象 [1] ，通过对植物间化感作用的研究，可以揭示植物种群、群落乃至整个生态系统的时空分布格局及其演化的原因和机制以及指导农林业生产 [2] [3] [4] [5] [6] 。植物化感物质释放途径的研究是植物化感作用研究的一个重要方面 [7] [8] [9] ，对认识植物间化感作用发生的机理和利用植物植物化感物质合成生物除草剂等都有非常重要的意义和价值，植物残体分解物化感作用的测定是植物化感物质释放途径研究中的一个基本方法。
滇青冈(Cyclobalanopsis glaucoides)为壳斗科青冈属植物，其以云南高原为分布中心，作为常绿阔叶林的优势种，生长于半湿润常绿阔叶林的各种类型中，具有较广的生态适应幅度，物种间化学关系比较复杂，是一个较好的进行化感作用研究的类群，目前对滇青冈的研究主要集中在形态学方面和生理生态学方面 [10] - [18] ，还未涉及到化感作用方面的研究。小麦(Triticum aestivum)由于其种子萌发速度快而整齐而成为植物化感物质释放途径研究中的一种较好的受体材料。
滇青冈化感物质的释放途径研究对认识滇青冈化感作用发生的机理和利用其化感物质合成生物除草剂有非常重要的意义和价值，为揭示滇青冈化感作用对云南高原森林植被自然恢复的影响机制提供理论依据和参考。
2. 材料与方法
2.1. 材料
供体植物滇青冈(Cyclobalanopsis glaucoides)的茎叶，采于楚雄紫溪山自然保护区(101˚22'13~ 101˚26'53E、24˚58'28~25˚04'02N，总面积160 km2，主峰海拔2500 m)，供体植物由楚雄师范学院植物分类学教授徐成东老师鉴定，受体植物小麦(Triticum aestivum)的种子购于楚雄益农种子店。
2.2. 滇青冈残体分解物水浸液的制备
采集滇青冈茎叶，清水洗净晾干，称取50 g，剪成2 cm的小段，用网袋装好后，把滇青冈茎叶埋土(深度分别为20 cm，40 cm，60 cm，每个深度设置3次重复)分解(分解时间分别为1 d，5 d，10 d，20 d，30 d)，分解后，将不同的滇青冈茎叶残体在60℃烘箱下烘干4 h (至恒重)后，用200 mL的蒸馏水在18℃~20℃下浸提24 h后过滤，以滤液作为培养液，用小麦作为受体植物进行生物测定。
2.3. 小麦种子萌发试验
试验时，将母液稀释为0.05 mg/mL，对小麦种子进行生物测定，以无土包埋仅经烘干的滇青冈茎叶水浸液处理的为对照，每天观察记录发芽(胚根或胚轴破皮1~2 mm时为萌发)种子的数量，直到种子不再萌发时为止，用发芽率(%)、发芽势(%)和发芽指数三个参数来分析 [19] [20] 。
同时计算相应的化感效应指数(RI)，RI = 1 − C/T (当T ≥ C时，RI ≥ 0；当T < C时，RI < 0)。式中，C为对照值，T为处理值。RI > 0为促进效应，RI < 0为抑制效应，绝对值的大小代表化感作用强度的大小 [21] 。
当小麦种子发芽完成后，测定其幼苗生长的部分指标(根长、苗高、根数目、幼苗鲜重和干重)，并分别计算其化感效应指数(RI)。
2.4. 小麦幼苗叶片中叶绿素含量的测定
叶绿素含量采用分光光度计法测定 [22] [23] [24] ，并计算其化感效应指数(RI)。
2.5. 数据分析
试验数据采用SPSS17.0软件进行分析，LSD显著性在0.05水平上检测。
3. 结果与分析
3.1. 滇青冈残体水浸液对小麦种子萌发率及其幼苗生长的影响
滇青冈残体水浸液对小麦种子萌发率及其幼苗生长的影响，从总体上看都呈现出“抑制”的现象，滇青冈茎叶在土壤中的分解时间和埋藏深度对小麦种子萌发率及其幼苗生长的部分指标(根长、苗高、根数目、幼苗鲜重和干重)都具有抑制作用，与对照相比都有显著差异(表1和表2)。
从滇青冈茎叶在土壤中的不同分解时间的处理及其化感效应指数变化的情况来看，虽然不同分解时间的处理都抑制了小麦种子的发芽率，但1 d、5 d、10 d的分解时间对小麦种子发芽率的负面影响更大(三者间都有显著差异)，尤其是处理5 d的，小麦种子的发芽率从对照的92%下降到73.66%，下降了18.34%，化感效应指数为−0.249，表现出明显的抑制作用，从1 d到5 d抑制效应增强，从5 d到10 d、20 d、30 d抑制效应减弱(表1和表2)。到30 d时，化感效应指数仅为−0.022，显示出随着处理时间的延长，其对小麦种子发芽率的抑制效应不断减弱的现象。其对小麦种子发芽势的影响(其间都有显著差异)也呈现出从1 d到5 d抑制效应增强，从5 d到10 d、20 d、30 d抑制效应减弱的现象，化感效应指数达到了−0.467，发芽势比对照下降了28%，表现出更加明显的抑制作用(表1和表2)。从发芽指数来看，从1 d到5 d抑制效应增强，从5 d到10 d、20 d、30 d抑制效应减弱的现象依存，化感效应指数达到了−0.507，表现出强烈的抑制作用(表1和表2)。
滇青冈茎叶在土壤中的不同分解时间的处理对小麦幼苗根长的影响(其间都有显著差异)也有同样的
Table 1. Effects of extract solution of residue decomposition of C. glaucoides on seed germination and seedling growth of T. aestivum
表1. 滇青冈残体水浸液对小麦种子萌发率及其幼苗生长的影响
注：表中同列数据后不同小写字母表示差异显著(α = 0.05)。
Table 2. Effects of extract solution of residue decomposition of C. glaucoides on RI of seed germination and seedling growth of T. aestivum
表2. 滇青冈残体水浸液对小麦种子萌发率及其幼苗生长的化感效应指数的影响
注：表中同列数据后不同小写字母表示差异显著(α = 0.05)。
现象，化感效应指数达到了−0.570，表现出强烈的抑制作用(表1和表2)。而其对小麦幼苗苗高(地上部分)的影响(除了1 d和5 d的处理外，其余各组间都有显著差异)也出现了同样的现象，化感效应指数达到了−0.446，表现出明显的抑制作用(表1和表2)。其对小麦幼苗根数目的影响(各组间都有显著差异)也有同样的现象，化感效应指数达到了−0.445，表现出明显的抑制作用(表1和表2)。其对小麦幼苗鲜重和干重的影响(二者各组间都有显著差异)也都出现了同样的现象，小麦幼苗鲜重化感效应指数达到了−0.651，小麦幼苗干重化感效应指数达到了−0.900，表现出更加强烈的抑制作用(表1和表2)。
但从滇青冈茎叶在土壤中的不同埋藏深度的处理及其化感效应指数变化的情况来看，无论是1 d、5 d、10 d还是20 d和30 d的分解时间中，20 cm、40 cm、60 cm的不同埋藏深度对小麦种子的发芽率、发芽势、发芽指数、小麦幼苗根长、苗高和幼苗根数目都没有明显的影响(不同埋藏深度之间没有显著差异)，虽然在1 d和5 d处理时间下的小麦幼苗鲜重和干重的变化随埋藏深度的不同而出现了显著差异，但从整体上看，不同埋藏深度对小麦幼苗鲜重和干重的变化没有明显的影响。
3.2. 滇青冈残体水浸液对小麦幼苗叶绿素含量的影响
与滇青冈残体水浸液对小麦种子萌发率及其幼苗生长的影响一样，滇青冈残体水浸液对小麦幼苗叶绿素a、b和总叶绿素含量及Chla/Chlb比值的影响，都呈现出“抑制”的现象，滇青冈茎叶在土壤中的分解时间和埋藏深度对小麦幼苗叶绿素a、b和总叶绿素含量及Chla/Chlb的比值都有抑制作用，与对照相比都有显著差异(表3和表4)。
从滇青冈茎叶在土壤中的不同分解时间的处理及其化感效应指数变化的情况来看，虽然不同分解时间的处理都抑制了小麦幼苗叶绿素a、b和总叶绿素含量及Chla/Chlb的比值(各组间基本都有显著差异)，但1 d和5 d的分解时间对小麦幼苗叶绿素a、b和总叶绿素含量及Chla/Chlb的比值的负面影响更大，与滇青冈残体水浸液对小麦种子萌发率及其幼苗生长的影响一样，还是处理5 d的抑制效应最明显，经过5 d时间的处理后，小麦幼苗叶绿素a的含量与对照相比，下降了45.09%，化感效应指数为−0.821，表现出非常强的抑制作用；小麦幼苗叶绿素b的含量与对照相比，下降了34.48%，化感效应指数为−0.526，表现出非常明显的抑制作用；小麦幼苗总叶绿素的含量与对照相比，下降了42.42%，化感效应指数为−0.737，也表现出了非常强的抑制作用；而小麦幼苗Chla/Chlb的比值与对照相比，下降了16.44%，化感
Table 3. Effects of extract solution of residue decomposition of C. glaucoides on seedling content of chlorophyll of T . aestivum
表3. 滇青冈残体水浸液对小麦幼苗叶绿素含量的影响
注：表中同列数据后不同小写字母表示差异显著(α = 0.05)。
Table 4. Effects of extract solution of residue decomposition of C. glaucoides on RI of seedling content of chlorophyll of T . aestivum
表4. 滇青冈残体水浸液对小麦幼苗叶绿素含量的化感效应指数的影响
注：表中同列数据后不同小写字母表示差异显著(α = 0.05)。
效应指数为−0.197，也表现出了明显的化感抑制作用。总的一个现象是，从1 d到5 d抑制效应增强，从5 d到10 d、20 d、30 d抑制效应逐渐减弱(表3和表4)。
但从滇青冈茎叶在土壤中的不同埋藏深度的处理及其化感效应指数变化的情况来看，无论是1 d、5 d、10 d还是20 d和30 d的分解时间中，20 cm、40 cm、60 cm的不同埋藏深度对小麦幼苗叶绿素a、b和总叶绿素含量及Chla/Chlb的比值都没有明显的影响(总体来看，不同埋藏深度之间并没有显著差异)，虽然Chla/Chlb的比值的RI变化随埋藏深度的不同而出现了部分的显著差异(表4)，但从整体上看，不同埋藏深度对小麦幼苗Chla/Chlb的比值的变化没有明显的影响(表3和表4)。
4. 讨论与结论
综上所述，与通常对一般植物化感作用研究结果相似 [25] [26] [27] [28] [29] ，与对照相比，滇青冈残体在土壤中的分解时间和埋藏深度对小麦种子萌发率和幼苗叶片中叶绿素含量及其幼苗生长的部分指标(根长、苗高、根数目、幼苗鲜重和干重)都表现出了化感抑制作用(表1~4)，说明滇青冈残体分解物化感作用是客观存在的，通过自然环境对其枯枝落叶的分解，释放其中的化感物质是滇青冈释放其化感物质的一个途径。
滇青冈茎叶在土壤中的不同分解时间的处理，对小麦种子的萌发率和其幼苗叶片中叶绿素含量及其幼苗生长的部分指标的化感抑制作用，呈现出从1 d到5 d抑制效应增强，从5 d到10 d、20 d、30 d抑制效应减弱的现象(表1~4)；但在1 d、5 d、10 d、20 d、30 d的分解时间中，20 cm、40 cm、60 cm的不同埋藏深度对小麦种子萌发率和幼苗叶片中叶绿素含量及其幼苗生长的部分指标没有明显的影响(表1~4)。
叶绿素含量的变化通过植物的光合作用直接影响到植株的鲜重和干重，叶绿素含量的不断降低，必然导致小麦幼苗光合作用的效率不断下降，从源头上抑制了小麦幼苗的生长及其抗逆性 [30] - [38] ，必然导致其幼苗生长的部分指标呈现出下降的现象。
研究结果有利于人们探索滇青冈化感作用对云南高原森林植被自然恢复的影响机制，对森林植被的人工恢复、对认识滇青冈化感作用发生的机理和利用其化感物质合成生物除草剂提供参考。
致谢
对云南大学叶辉教授和杨树华教授给予的帮助表示感谢！
基金项目
国家自然科学基金(31360102)：滇青冈化感作用研究与生物除草剂研制；楚雄师范学院院级学术骨干计划(2011《植物学》)。
参考文献
NOTES
*通讯作者。