1. 前言

国际上普遍认为，动物应享有五项基本福利(亦称五大自由)，其中“免受饥渴的自由”是指：为动物提供适当的清洁饮水、保持健康和精力所需的食物，使动物不受饥渴之苦，实验动物的饮水质量与动物的健康密切相关 [1] 。因此，保证水的充分供给和饮水卫生，在动物饲养与管理工作中必须引起足够的重视。

2. 研究区概况

北京南海子麋鹿苑博物馆(以下简称“麋鹿苑”)位于北京市大兴区亦庄镇、旧宫镇、瀛海镇三地交汇处(N39˚42'~39˚52'，E116˚20'~116˚32')，平均海拔31.5 m，占地60 hm²，其中水域面积(表流湿地)逾8.3万m²；四季分明，属典型暖温带半湿润气候区。麋鹿苑承担着国家一级保护动物——麋鹿的繁衍与保护研究工作，是我国第一座以半散养方式为主的麋鹿自然保护区 [2] 。麋鹿苑表流湿地的水源一部分来源于小红门污水处理厂处理后的再生水，一部分靠自然降水获得，苑区表流湿地水深平均1 m。

3. 采样及检测方法

3.1. 采样方法

研究人员分别于2016年5月27日、6月21日、7月25日上午8点~9点之间赴苑区文化桥东等5处采样点采集水样(见图1)。具体采样方法如下：科研人员佩戴无粉乳胶手套，着白大褂，精心操作、避免水体被人为污染。使用不透明塑料采样瓶进行采集，每处水样采集3个重复，每个水样采集250 mL。采集水样时需保证采样瓶口低于水平面30公分，采集后盖紧瓶盖立即送往实验室进行检测。

3.2. 分析指标介绍

pH值是水化学中常用和最重要的检验项目之一，水在净化处理过程中，由于投加混凝剂和消毒剂等，可使pH 值下降或升高 [3] ，水的酸碱度直接影响动物的身体健康。总磷、总氮是水体富含有机质的重要指标。氮磷含量过多会引发藻类植物过度生长．水体富营养化，发生水华或赤潮，打乱水体的平衡，因此水中总氮总磷含量的测定尤为重要 [4] 。细菌总数：水体受到生活污水、工农业废水或人和动物粪便的污染后，水中的细菌数量可大量增加，其中病原菌也随之增加，引发传染，危害健康，因而水中细菌总

数和大肠菌数量可反映水体受微生物污染的程 [5] 。粪大肠菌群：粪大肠菌群是水质污染的重要指标之一 [6] ，水域若遭受到粪大肠菌群的严重污染可能会引起流行疾病发生 [7] 。

3.3. 检测方法

水样送到实验室后进行检测，在监测前需左右轻轻晃动采样瓶，使瓶中水样得到充分均匀。

pH值检测采用pH计检测法：先用蒸馏水仔细冲洗电极，再用样水冲洗，然后将电极浸入水样中，待读数稳定后记录pH值 [8] 。

总磷采用钼锑抗分光光度计法：每个样品吸取25 mL水样放入5个试管中，加过硫酸钾4 mL，加塞后管口用纱布包紧，放入高压灭菌锅，保持锅内压力120℃ 30 min，待压力指针降至零后，取出放冷，向试管内加入1 mL 10%抗坏血酸，混匀。30后加入2 mL钼酸盐溶液，放置15 min。用10 nm比色皿，于700 nm波长处，测量吸光度 [8] 。

总氮采用过硫酸钾氧化紫外分光光度计法 ：每个样品吸取10毫升水样放入5个试管中，加碱性过硫酸钾5 ml，加塞后管口用纱布包紧，放入高压灭菌锅，保持锅内压力120℃ 30 min，待压力指针降至零后，取出放冷，向试管内加入(1 + 9)盐酸，用无氨水稀释至25 mL。用10 nm比色皿，分别在220 nm及275 nm波长处，测量吸光度 [8] 。

水中粪大肠菌群采用多管发酵法：每个样品至少用三个不同的水样量接种。同一接种水杨量要有五管。将水样充分混匀后，将水样分为10 mL、稀释10倍的1 mL、稀释100倍的1 mL三种水样量；10 mL水样的试管内应装有三倍浓度乳糖蛋白胨5 mL，其它两种水样可放到普通浓度的乳糖蛋白胨溶液10 mL中 [3] ，试管在37℃下培养24 h，试管产酸产气为阳性，根据不同接种量的发酵管所出现的阳性结果的数目，从MPN表中查出相应指数，计算结果 [8] 。

细菌总数的测定法：以无菌操作方法用1 mL吸管吸取充分混匀的水样或2~3个适宜浓度的稀释水样1 mL，注入灭菌平皿，注入15 mL营养琼脂培养基，晃动平皿，待琼脂冷却后，翻转平皿，使底面朝上，置于37℃恒温箱中培养24 h，进行菌落计数 [8] 。

3.4. 检测标准

如表1所示。

4. 检测结果与分析

5月(5月27日)，天气晴，20℃。

根据表2可以看出，该月pH值均值为7.78，总体呈现1 < 3 < 2的变化趋势。原因是茅草屋出水口的水是从外面引来的中水，中水pH值较高，中水进入麋鹿苑后，经过植物的影响，数值变得较小。

水中的病原菌多数来源于病人和病畜的粪便，通过表2可以看出，茅草屋出水口与文化桥西，两处检测出来的粪大肠菌群数量是相当的，东区石桥处最少，可能是因为，大部分麋鹿跑到这两处生活，它们的排泄物使这两处的粪大肠菌群与细菌总数大量增加。

6月(6月21日)，天气，闷热，摄氏度25℃。

6月采样当日天气情况，根据表3可以看出，6月份总磷含量最高的是东保护区0.44 μg/ml，最低处为文化桥西0.26 μg/ml，本月麋鹿开始回到东边保护区生活，只在文化桥西处留有几头麋鹿，麋鹿回到东边保护区生活，影响到水中粪大肠菌群数量，东区粪大肠菌群数量高于西区。

7月(7月25日)，7月20日暴雨，23℃。

根据表4可以看出，东边保护区水质好于西边，可能是因为西边植被比东边植被茂盛，大量降雨使植物叶片凋零，加剧了氮磷含量的增加。7月份的数值大都低于6月份的，这可能是因为7月份的雨水多，稀释了水中的各项元素。

根据表5可以看出6月份的氮磷含量超过5月、7月，这可能是因为在6月份时水中含氧量降低，湖面漂浮大量死鱼以及水生植物死亡，在植物分解时会产生氮磷，从而影响氮磷含量。水生植物在分解前期，水体总磷浓度迅速升高． 随着分解的进行，水体总磷浓度逐渐下降 [10] ，加上降雨增多降雨尤其是暴雨随降雨历时的延长，总氮含量呈现降低趋势，降雨不但使河流流量发生变化 [11] ，而且伴随着降雨对河流的稀释、降解，河流中总氮含量明显减少 [12] 。5月份的细菌总数和粪大肠菌群数量高于6、7月份主要是因为进入6、7月份后雨水量增多，通过查询天气预报可知6月雷阵雨14次、7月下雨16次，大量的雨水稀释了水中的细菌总数，与粪大肠菌群。经过检测，这三个月大肠杆菌种类为E. coli和肺炎克雷伯氏杆菌。

5. 结论与讨论

在5月份第一次检测后，增加了文化桥东西的检测，6月结果显示，总磷、总氮、细菌总数、粪大肠菌群均有差异，其中总氮和粪大肠菌群的差异达到极显著水平。说明文化桥东西两侧水质差异较大，采样地点设置合理。文化桥东水质好于文化桥西分析其原因可能是荷花池对水质有一定的净化作用。而7月结果显示，总磷、总氮、粪大肠菌群有差异，细菌总数差异不大，但文化桥西粪大肠杆菌低于文化桥东，可能是由于降水后对水中细菌有一定的影响。

根据本单位动物组工作人员记录2016年3月25日、4月11日、4月24日、4月26日、5月1日、5月8日、5月18日、5月31日、6月17日、7月7日、7月8日共有11只麋鹿死于类似出血性肠炎的症状，其中5月18日、6月17日、7月8日样本均发现产气荚膜梭菌以外的细菌，如温和气单胞菌、泛菌属、大肠杆菌E. coli等，这些细菌的感染多与水和水生动物有关，常引起败血症、腹泻和肠内感染，会出现水样便，含血粪便，这些症状与死亡麋鹿剖检结果吻合，一定程度上说明水质对麋鹿健康有一定影响。

^*该指标来源于：地表水环境质量标准(GB3838-2002 [9] )。^**无公害畜禽饮用水水质标准：总大肠菌群100个/L。

水中富营养化严重，几次采样时，水面都有水华现象。观鸟台处的总磷、总氮一直偏高，平时经常观察到水华产生，这可能是因为水体补充不够及时，以后需要加大补水量。百度得知水华(Algal Blooms)指淡水水体中藻类大量繁殖的一种自然生态现象，是水体富营养化的一种特征，主要由于生活及工农业生产中含有大量氮、磷的废污水进入水体后，蓝藻(又叫蓝细菌，包括颤藻、念珠藻、蓝球藻、发菜等)、绿藻、硅藻等大量繁殖后使水体呈现蓝色或绿色的一种现象。此处氮磷含量偏高，是水藻繁殖较快，经常看到水华的原因。

进入6月后，水中的pH值有降低的趋势，而此时总磷含量显著上升，茅草屋出水口附近水域常发生鱼类死亡现象，细菌总数多，与保障部联系后增加了额外增氧装置，增加补水，再加上下雨的原因，到七月份检测时，水中的总磷、总氮、细菌总数均有所下降，一定程度上说明增氧装置和补水有效。

7月份检测时，刚刚经历和大暴雨，水中细菌总数虽然有所下降，但是大肠菌群的数量和组成却发生了改变，因此并不能认为雨后水质变好，而是应该增加警惕，密切关注水体的下渗状态，同时观察麋鹿的生活状态，及时消毒或补充干净水源。

随着夏天的到来，5、6、7三个月的平均气温和湿度呈增加趋势，总磷值一定程度的增加，其他变化不明显。5月，麋鹿从东边放归到西边，东西两侧均有动物活动，大肠杆菌东边保护区数量低于西边。在领导的指示下，积极监测麋鹿等野生动物饮水健康，关注水质，增加补水增氧和消毒，以确保麋鹿的健康。

通过实验分析，未来的监测内容需要增加采样的天气、气温、补水、降雨、动物活动频率，以便更好的对结果进行讨论和分析，对麋鹿的饮水健康和生存环境进行更好的监测。

参考文献