XEVO超高效液相色谱/三重四极杆质谱联用仪(Waters公司)，MS204TS/02电子分析天平(梅特勒–托利多仪器(上海)有限公司)，2-16P离心机(德国SiGMA公司)，氮吹仪(天津恒奥科技发展有限公司)，VORTEX 3涡旋震荡仪(IKA公司)，Milli-Q A10超纯水仪(密理博公司)。

橡苔提取物(定性，CAS：90028-68-5，Anpel公司)、树苔提取物(定性，CAS：90028-67-4，Anpel公司)，β-苔黑酚酸甲酯(纯度99.20%，CAS：4707-47-5，Cato公司)为标准品，甲醇、乙腈均为色谱纯，实验用水为超纯水。

称取β-苔黑酚酸甲酯标准物质0.01 g (精确到0.0001 g)至10 mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度，制成浓度为1000 mg/L标准储备液。移取0.1 mL标准储备液于100 mL容量瓶中，用甲醇定容配制成1.0 mg/L的标准中间溶液1，再移取1.0 mL标准中间液1于10 mL容量瓶中，用甲醇定容配制成100 μg/L的标准中间溶液2。分别移取0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL标准中间溶液2于10 mL，容量瓶中，用甲醇定容配制成0.5 μg/L、1.0 μg/L、2.0 μg/L、5.0 μg/L、10.0 μg/L的标准系列工作溶液，待用。

试样用剪刀剪碎(约2 mm × 2 mm)，准确称取剪碎后的样品1 g，精确至0.0001 g，置于50 mL刻度离心管中，用甲醇定容至25 mL，涡旋振荡至摇匀，超声30 min后，以8000 r/min离心5 min，转移上清液于离心管中，氮气吹至近干，加入1 mL甲醇复溶，经0.22 μm滤膜过滤，滤液作为待测溶液。

色谱柱：Kinetex F5色谱柱(100 mm × 3.0 mm × 2.6 μm)；

进样量：5 μL；

柱温：25℃；

流速：0.4 mL/min；

流动相：A：水，B：乙腈，梯度洗脱，梯度洗脱程序见 表1 。

ESI离子源，负离子模式；离子源温度：150℃；目标物质的质谱参数见 表2 。

β-苔黑酚酸甲酯溶于氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、DMSO、丙酮、甲醇等，考虑到实验安全性，选用了乙腈和甲醇作为溶剂进行比较，结果显示甲醇作为溶剂回收率更好，且价格较乙腈更便宜，因此最后选择甲醇作为样品前处理使用的溶剂。

本实验中选择Kinetex F5色谱柱(100 mm × 3.0 mm × 2.6 μm)和Waters C18色谱柱(100 mm × 4.6 mm × 3.5 μm)，结果表明，β-苔黑酚酸甲酯在Kinetex F5色谱柱峰型较好，响应高，保留时间适当。因此选择Kinetex F5色谱柱进行实验。

实验尝试了分别采用水和甲醇、水和乙腈作为流动相，进行不同浓度的梯度洗脱。实验结果发现，乙腈和甲醇与水混合比例相同的情况下，采用水和乙腈洗脱出峰时间短，峰形较窄，且基线噪声小、较少杂质干扰、保留时间稳定，分析原因是乙腈的洗脱能力更强、粘度较甲醇小，从速率方程角度说，流动相传质阻抗小，有利于柱效提高。最优梯度洗脱程序见 表1 。实验还考察了进样体积(5、10、15 μL)对分析结果的影响，进样量为5 μL时的峰形最优，灵敏度较好，增大进样量会使得峰展宽。标准品谱图如 图1 所示。

分别将0.5 μg/L、1.0 μg/L、2.0 μg/L、5.0 μg/L、10.0 μg/L的标准系列工作溶液按照2.4的仪器工作条件进行测定，以峰面积x对浓度y进行线性分析，得到的线性回归方程为y = 280.617 x + 8.34411，相关系数R² = 0.999455，表明β-苔黑酚酸甲酯在浓度0.5~10 μg/L范围内线性良好。以信噪比S/N = 3进行计算，可得本方法检出限为0.1 μg/kg。

为验证本方法的准确性和稳定性，进行了加标回收实验，在样品基质中均匀加入标准溶液，使得目标物质在样品中的含量为0.5 μg/kg、5 μg/kg、10 μg/kg，每个浓度平行测定6次，根据检测结果计算得出加标回收率在 94.6%~104%之间(如 表3 所示)，相对标准偏差(RSD)在1.85%~4.63%之间。

按照本文建立的方法对市售的树苔提取物和橡苔提取物进行检测。实验发现，树苔提取物中检出β-苔黑酚酸甲酯的含量为2.0%，橡苔提取物中检出β-苔黑酚酸甲酯的含量为11.0%，样品加标回收率良好，因此证实可以通过检测妇婴卫生用品中是否含有β-苔黑酚酸甲酯来确认样品中是否含有树苔提取物或橡苔提取物。