光合突变株作为研究微藻光合作用的良好材料，通常利用物理或化学方法诱变育种获得。在莱茵衣藻、小球藻等微藻中运用光合突变体对光合作用机制的研究较多。光合突变株应用广泛，在不同领域中都在发挥作用。本文章通过对光合突变株研究进展进行整合描述，旨在对光合突变株的诱变等方面进行指导。

光合突变株，微藻，光合作用，诱变育种

Di Wang

School of Life Science, Liaoning Normal University, Dalian Liaoning

Received: Feb. 27^th, 2022; accepted: Mar. 15^th, 2022; published: Mar. 22^nd, 2022

Photosynthetic mutant strains are used as good materials for studying microalgae photosynthesis and are usually obtained using physical or chemical methods for mutagenesis breeding. Photosynthetic mutants have been widely studied extensively in microalgae such as Chlamydomonas reininensis and Chlorella vulgaris. Photosynthetic mutant strains are widely used and play a role in different domains. This article aims to guide the mutagenesis of photosynthetic mutant strains by integrating the research progress of photosynthetic mutant strains.

Keywords:Photosynthetic Mutant Strains, Microalgae, Photosynthesis, Mutation Breeding

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在微藻的研究中光合作用的研究是非常重要的部分，为了更好地研究微藻的光合作用相关的基因，在实验中研究者通常会通过不同方式来获取光合突变株。微藻光合突变株的诱变通常分为物理方法和化学方法，物理方法一般利用紫外线、α射线、β射线、γ射线、X射线等对藻体进行处理，化学方法则使用甲基磺酸乙酯(EMS)、亚硝基胍(NTG)等对藻体进行处理。

现如今光合突变体的作用并不局限于光合作用方面的研究。通过诱变育种获得光合突变株，其产物可应用到医疗保健、美容美妆、商品染色等领域，对于开发无污染的新型能源有着重要作用。

本文通过对近年来微藻光合突变株研究的整合，总结了光合突变株诱变方法、光合突变株的生理生化变化以及微藻光合突变株的应用，旨在对微藻光合突变株的诱变等方面提供理论指导，以期推进对微藻的深层研究，促进微藻及其产物的工业化生产，发挥微藻更大的实用价值和商业价值。

突变是生物在进化过程中必不可少的生物学现象，突变株也是研究植物生理性状的良好材料。国内外对藻类突变株如莱茵衣藻、小球藻等的研究较多，也有众多诱变育种的方法。通常采用诱变的方法主要分为两类，一是物理方法，二是化学方法。

物理方法主要是利用射线对藻体进行诱变，包括紫外线、α射线、β射线、γ射线、X射线等。如在探究紫外线的辐射对雨生红球藻生理指标超微结构的影响时，蒋霞敏等人用不同剂量的紫外线照射来诱导雨生红球藻突变，发现紫外辐射对雨生红球藻有致死效应 [ 1 ]。同样，庄惠如等人选育高产藻株时，也利用紫外线辐射使雨生红球藻诱变，得到了两株营养细胞更大，藻体生长速率更快，虾青素积累更多的高产藻株 [ 2 ]。化学方法则是使用化学药品对藻体进行诱变处理，例如甲基磺酸乙酯(EMS)、亚硝基胍(NTG)等。如Tjahjono等人使用甲基磺酸乙酯(EMS)诱导雨生红球藻突变，并筛选出多株抗除草剂和抗烟碱的藻株 [ 3 ]，以此培育出虾青素高产的雨生红球藻。

也有学者同时利用这两种方法进行诱变育种，例如Sun等人利用EMS和紫外线先后进行对雨生红球藻的诱变育种，并获得了稳定遗传的藻株 [ 4 ]。Sandesh等人分别利用紫外线，EMS和亚硝基胍(NTG)诱导雨生红球藻突变，结果发现虾青素积累显著增加，同时紫外线诱变株的番茄红素环化酶活性居于首位，其次是NTG诱变株的番茄红素环化酶的活性 [ 5 ]。

光合作用的机制原理及其物质基础已经有了众多的进展和突破，其主要研究材料集中在莱茵衣藻、小球藻等几类生物上。其中，利用光合突变株对植物光合作用进行研究，也取得了众多的成果。

微藻这类低等植物与高等植物的光合系统存在些许差异，如微藻中的LHCI天线蛋白较大 [ 6 ] [ 7 ]，由6~14个亚基组成 [ 8 ] [ 9 ]，这种差异可能是高等植物为了适应其生长环境有关 [ 10 ]。在莱茵衣藻的光反应中，光系统I的9个Lhca天线蛋白被转化，并在细菌中成功转化表达 [ 11 ]，并且9个Lhca光捕获蛋白在中心的一侧围绕 [ 12 ]。在突变体的类囊体中，PSI和LHC的非正确组装，可能会导致PSI中的能量解偶联 [ 13 ]。

在状态转换中，STN7激酶催化着LHCII的磷酸化，激发的能量被转移到PSII和PSI中 [ 14 ]。叶绿体NAD(P)H脱氢酶(NDH)相似复合体独立于PSII，在减少系统间的电子传递链(ETC)中起着重要作用 [ 15 ]，同时在C₄植物束鞘细胞的电子转移中也扮演重要角色 [ 16 ]。有研究表明PGR5蛋白调节线性电子转移(LET)和循环电子转移(CET)之间的电子分配 [ 17 ]。类囊体膜调节蛋白缺陷的拟南芥突变体在不同光照条件下的生长结果显示：缺乏Ser/Thr蛋白激酶STN7的拟南芥stn7突变体延迟生长，而缺乏PGR5蛋白的拟南芥pgr5突变体则表现为完全致死 [ 18 ]。

莱茵衣藻中的CHLH基因编码镁离子螯合酶的大亚基，缺失CHLH (brs1和ch11)基因的突变株，其藻细胞在光照下死亡 [ 19 ]。同时莱茵衣藻中叶绿素LTS3基因能够对镁离子螯合酶的活性进行调控，导致缺失该基因的突变株在无光异养条件下，膜结构被严重破坏，以至于无法合成叶绿素；但是在光下，随着叶绿素前体的消耗，膜结构又得以恢复 [ 20 ]。缺失叶绿体atpE基因的突变株仅能够在无光但有外加碳源的条件下生长 [ 21 ]。

现今，光合突变株应用广泛，在多个领域中发挥着重要作用。雨生红球藻是一种淡水微藻，当它的生存环境恶化，生长受到胁迫时，雨生红球藻就会自发产生并积累虾青素。虾青素全称为3,3′-二羟基-4,4’-二酮基-β胡萝卜素，也被称作虾红素。它是萜类物质，是类胡萝卜素的一种，具有较强氧化性。作为天然的抗氧化剂，虾青素广泛地应用于人们的日常生活以及研发生产如医药保健、商品染色等领域 [ 22 ]。目前，在自然界中，雨生红球藻是已知的能够合成虾青素的物种中虾青素合成最多的物种之一 [ 23 ]，其合成虾青素的含量最高可达藻细胞干重的4%。雨生红球藻中虾青素的合成和积累与外界环境的胁迫有关，是藻体应对恶劣环境的一种应激保护。诱导雨生红球藻合成虾青素的条件包括营养缺失，高光胁迫，高盐胁迫等。光照强度是影响虾青素合成的比较重要因素之一，能够直接影响藻类的生长代谢及其有机物积累，进而影响到藻细胞中虾青素的合成和积累 [ 24 ]。因此对雨生红球藻进行诱变育种，筛选出虾青素含量提高的光合突变株，将虾青素应用到医疗保健、美容美妆、生物染色等领域，可发挥其更大的商业价值。

近年来，传统能源储备不足及其燃烧后所产生的环境污染问题，寻找并开发可代替传统能源产能的新型能源，以此缓解全球范围内温室效应的情况亟待解决 [ 25 ] [ 26 ]。藻类通过光合作用释放氧气的同时，在厌氧条件下会释放出氢气，而氢气是清洁的新型能源之一，这使得微藻光合产氢成为全球研究的焦点之一 [ 27 ] [ 28 ]。微藻产氢的主要来源是光能，以光能和水作为电子供体，通过微藻的生理活动便可生成氢气，整个过程无需高温高压燃烧等，基本无碳无污染。在微藻的光合作用中，水的光解是制氢的首要步骤，通过光反应参与水的裂解从而获得电子。微藻通过光合产氢的电子传递途径如图1所示 [ 29 ]。然而，

图1. 微藻产氢的电子传递链

微藻光合产氢面临着有氧环境下微藻体内的氢化酶会失活的问题。通过物理或化学方法对微藻进行诱变育种，筛选出具有高光合活性的突变株，以此减少活性氧的产生，增加氢气的产能。Lanzhen Wei等人研究后发现外源 HSO 3 − 可消耗微藻在高光诱导下PSI形成的超氧离子(   O 2 − )，促进微藻光合产氢， HSO 3 − 消耗氧气诱导微藻进行光合产氢的机理见图2 [ 30 ]。除了微藻产氢外，具有绿色环保优点的微藻生物柴油也是新兴的可再生资源 [ 31 ]，同样备受关注。三角褐指藻是一种海洋模式硅藻，它生长繁殖快，培养方法和条件简单，并且富含油脂 [ 32 ]。可通过诱导三角褐指藻突变，提高其油脂产量。

图2. HSO 3 − 消耗氧气诱导微藻光合产氢的机理

关于微藻光合作用机制的研究，主要集中在莱茵衣藻、小球藻等少量微藻种类上。我国水资源丰富，水域内生物种类繁多，对于其它微藻光合机制仍需进一步探究。利用微藻生长繁殖较快、生长条件简单等特点，进一步扩大微藻的生物产量，将其应用到更多领域中，提高生活质量的同时降低生活成本。大力开发微藻产氢、微藻生物柴油等新型能源，代替日渐消耗的煤炭、石油等传统能源，有利于改善环境，促进可持续发展。

王 迪. 微藻光合突变体诱导的研究进展 Advances in the Induction of Photosynthetic Mutants of Microalgae[J]. 生物过程, 2022, 12(01): 26-31. https://doi.org/10.12677/BP.2022.121004