实验用沂河鲤鱼共30尾，于2022年采自沂河沂南段，均为沂河野生个体，体长25.2~40.4 cm，体重998.5~1745.6 g。

取活体沂河鲤样本，经MS-222麻醉后，观察鱼体外部形态特征，并进行拍照。用游标卡尺(精确到0.01 mm)测量30尾沂河鲤样本的外部形态指标，主要包括全长、体长、体高、头长、吻长、眼径、眼间距、尾柄长和尾柄高等，用电子天平(精确到0.01 kg)称量体重。另外，对背鳍鳍条、腹鳍鳍条、胸鳍鳍条、臀鳍鳍条、尾鳍鳍条、侧线鳞、侧线上鳞、侧线下鳞、第1鳃弓鳃耙数、牙齿、脊椎骨、下颌齿等可数性状进行计数。

参照朱树人 [3] 的方法进行沂河鲤染色体标本制备及染色体核型的分析。

取采集的野生沂河鲤活体样本，用丁香酚麻醉后，参照杨玲 [4] 的方法，制备肌肉(M)和脾脏(S)组织的同工酶样品抽提液。

试验采用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法，LDH和MDH同工酶的凝胶浓度、凝胶缓冲系统如 表1 所示。电泳方法参照杨玲 [4] 的方法执行，染色方法参照文献 [5] - [7] 稍作改进，酶谱分析参考杨玲 [4] 的方法。

所得数据采用SPSS20.0进行分析处理，并计算平均数、标准差、相关方程和R²等。

观测30尾沂河鲤外形( 图1 )，头较小，鱼体瘦长呈纺锤形，背部稍微隆起。口亚下位，吻端圆，可伸缩。须两对，颌须一对，较长，鼻孔两对，中间有膜相隔。体表被有较大圆鳞，侧线鳞完全且平直。背部灰色，体侧泛有金黄色光泽，腹部白色。背鳍、胸鳍灰色，腹鳍由灰白色渐变到橙色，臀鳍由黄色渐变到红色，尾鳍由灰色渐变到红色。

测得沂河鲤可数性状见 表2 。其中，背鳍硬棘数3，鳍条数15~19；尾鳍鳍条数24~26；臀鳍硬棘数3，鳍条数5；腹鳍鳍条数8~9；胸鳍鳍条数15~17。侧线鳞数35~39，侧线上鳞数5~6，侧线下鳞数5~6，第1鳃弓外鳃耙数19~23，口须2对，下咽齿3行，脊椎骨数34~35。各可数性状中臀鳍鳍条数和口须数比较固定。

沂河鲤可量性状及各形态性状的比例关系见 表3 和 表4 。其中，沂河鲤体长/体高为2.98~4.25，体长

/体宽为4.44~7.01，背腹轴较大于左右轴，鱼体较长，身体呈纺锤形。体长/头长为3.50~4.57，头长/头高为1.53~2.05，头长/吻长为2.38~3.21，尾柄长/尾柄高为1.27~1.84倍，尾柄较长。沂河鲤可量性状比值范围及相关方程见 表4 。沂河鲤全长/体长的标准偏差为0.02，在所有指标比值中的标准偏差最小，表明全长与体长的比值变化范围最小；体长/体宽的标准偏差为0.62，最大，表明体长与体宽的比值变化范围最大。全长与体长的相关方程的R²为0.990，大于0.8，在所有指标比值中的线性相关性最高，说明全长的变化中有99.0%是由体长引起的。

油镜下对形态清晰且分散良好的100个中期分裂相进行染色体计数，结果见 表5 由此，可确定沂河鲤属于二倍体鱼类，其染色体数目2 n = 100。

通过测量染色体相关参数并用Photoshop将染色体排列好( 图2 )，由 图2 可见，沂河鲤具有50对染色体，其中，有11对中部着丝点染色体(m)、15对亚中部着丝点染色体(sm)、10对亚端部着丝点染色体(st)和14对端部着丝点染色体(t)，组型公式为2n = 22m + 30 sm + 20st + 28t，臂数NF = 152。沂河鲤各染色体的类型、相对长度、臂比见 表6 。

续表

沂河鲤脾脏和肌肉中的乳酸脱氢酶(LDH)电泳图谱如 图3 所示。由 图3 可见，不同组织中LDH表达条带数目和酶活均不同，表现出明显的组织特异性。其中，在脾脏中共检测到6条迁移速率不同的酶带，且迁移率相同。其中LDH1表达活性较弱，而LDH2~LDH6表达活性较强，4尾样本鱼酶谱相同，都检测到6条带，其中LDH-5酶带较宽。4尾样本鱼的肌肉LDH酶带数和表达活性程度相同，均有2条活性很强的酶带，且LDH1较LDH2表达活性相对较弱；由 图3 可见，肌肉中的LDH酶带染色较深，脾脏中的酶带染色稍浅，说明脾脏中LDH活性相对较弱。

硬骨鱼类的苹果酸脱氢酶(MDH)是由两个基因编码的二聚体酶，存在上清液型(s-MDH)和线粒体型(m-MDH)两部分 [8] 沂河鲤的MDH在肌肉和脾脏组织中均有表达( 图4 )。脾脏中MDH活性比较强，肌肉中的活性稍弱。其中m-MDH三条酶带两种组织中都存在，只是活性强弱有差异，肌肉中的活性强于脾脏中活性。s-MDH在2种组织中表达的差异较显著，s-MDH2、s-MDH3和s-MDH4在各组织中都存在，在肌肉中的活性强于脾脏中的活性；s-MDH5在脾脏中的活性强于肌肉中的活性。但是，s-MDH1在肌肉中没有检测到活性。沂河鲤MDH酶谱表明，除了表达有明显组织差异性以外，不同组织中的表达活性也有差异。

鱼类的形态特征是在物种漫长进化过程中受遗传因子和环境因子共同作用所展现出来的表型特征 [2] ，通过测量鱼类外部形态的可量性状和可数性状，可鉴别出不同鱼类品种 [9] 。秦改晓 [2] 报道黄河鲤胸鳍和腹鳍呈橘黄色，本研究观察到沂河鲤的背鳍、胸鳍灰色，腹鳍由灰白色渐变到红色，臀鳍由黄色渐变到红色，尾鳍由灰色渐变到红色，与黄河鲤稍有差异。一般认为调控鱼类体色的主要因素有遗传、营养、神经内分泌、病害及环境因素等 [10] 。环境条件会影响鱼类色素的形成，鱼类也会通过体色的变化适应其生活环境 [11] 。因此，我们分析造成这种差异的主要原因除了不同种间的差异之外，还有可能与其生长环境有关，当然也与观察者的主观判别有关。我们查阅了已报道的其他几种鲤鱼的可数性状(见 表7 )，通过比较发现，其他几种鲤鱼的可数性状与沂河鲤存在一定差异。其中，沂河鲤的胸鳍鳍条数为1517条，均高于其他几种鲤鱼。我们推测这可能与所测样本的数量和规格有关。在可量性状方面，沂河鲤各形态性状的相关关系中全长和体长的判定系数R²最大，为0.990，符合线性相关且相关程度较高。与秦改晓 [2] 报道的黄河鲤相比，沂河鲤体长/体高为2.98~4.25，而黄河鲤为3.44~4.32，说明黄河鲤较沂河鲤鱼要偏瘦长。沂河鲤尾柄长为尾柄高的1.27~1.84倍，而黄河鲤尾柄长为尾柄高的0.85~1.52倍；说明沂河鲤的尾柄较长，这些比例特征与外形观测基本一致。因此，在分析鱼类可数可量性状的时候一定要选择合适大小的样本，并加大样本量的选择，降低个体差异造成的误差。

染色体是生物遗传物质的载体，它承担着对遗传信息的储存、复制、传递及控制基因的活动，调节基因的重组等一系列重大生物学功能 [12] 。本研究结果与其他品种的鲤鱼染色体数及核型进行了比较(见 表8 )，发现不同的鲤鱼品种的二倍体染色体数都是100条，只是染色体核型及臂数稍有差异。造成差异的原因我们推测可能是由于不同鲤鱼品种的染色体多态性不同，也可能是试验方法不同，选取的染色体时相不同以及研究者人为配对误差等。

同工酶是生物体内基因转录和翻译的直接产物，反映编码酶蛋白的DNA序列信息，迄今已发现数百种具有不同分子形式的同工酶 [17] 。LDH是参与糖酵解的关键性酶，在无氧条件下能将糖酵解产生的丙酮酸还原为乳酸，以维持机体的能量需要 [18] 。MDH是糖代谢三羧酸循环过程中的重要酶，在细胞中的功能主要是使苹果酸脱氢，催化草酰乙酸的形成，参与细胞的有氧代谢 [19] 。本研究发现沂河鲤的肌肉和脾脏组织中均能检测到LDH和MDH同工酶的表达，但是活性有差异，说明这两种同工酶在沂河鲤的两种组织中的表达具有组织特异性。除了检出的酶带数目不同外，不同组织酶带的活性程度也存在差异，表现在酶带染色深浅程度不同和显色时间快慢不同，其中肌肉LDH酶带染色程度较深，表明沂河鲤有较强的耐低氧特性，也再次印证了不同组织中同工酶的表达差异与该组织执行的生理功能相一致。