试验用海马产自汉沽海马养殖基地，随机选取1对亲本所产的体质健壮的子三代幼体(F3)，刚出生海马均处于浮游阶段，多分布在水体中上层，经50 d的饲养后，有部分海马出现向水体下层移动现象，随机选择规格5.67 ± 0.12 cm相近的个体于试验系统中驯养一周后开始试验。驯养与试验均在96 L玻璃缸(60 cm × 40 cm × 40 cm)中进行，实际水量为72 L，养殖用水为沙滤海水。驯养及试验期间盐度为30.0 ± 1.0‰，温度为26.0℃ ± 0.5℃，光周期为12 L:12 D，光照强度为2400~3600 lx。驯养期间，按照试验条件，分别投喂相应大小、种类饵料，每日饱食投喂两次(8:00 am, 15:00 pm)，试验用活卤虫来自天津农学院水产生态及养殖重点实验室，试验用冰冻糠虾Mysis spp购于天津丰年水产有限公司，投喂2 h后吸出残饵并补充适量的海水。

试验一 海马对不同饵料规格的选择性试验

幼体海马在不同的生长发育阶段，摄食的适口饵料规格存在一定差异。首先，为了确定海马(5.67 ± 0.12 cm)最适的饵料规格，设计了一组活卤虫的饵料规格试验，本试验有3个饵料规格组，分别为A组(2215 ± 51.8 µm)，B组(5080 ± 83.6 µm)，C组(8440 ± 114.1 µm)通过观察大海马对不同规格单一饵料和混合规格饵料(见 表1 )的摄食及行为情况，确定最适的活饵规格。

试验前，将暂养缸的试验海马放入试验缸中饥饿适应1 d。试验缸3个侧壁及底部用规格为1 cm×1 cm的格子纸黏贴，一个侧壁留有侧壁1/3 (将侧壁从左到右均分成三份，留中间一份)的部分用于架设摄像机进行拍摄。试验拍摄时，首先，采用2个Sony数码摄像机拍摄，一台架设在玻璃缸的正上方，一台架设在玻璃缸的一侧，同时观察侧面观(垂直速度)和俯面观(水平速度)，记录海马摄食速率、摄食量、对饵料敏感度、摄食轨迹等摄食行为参数。据预试验分析，海马的平均摄食时间在28 ± 0.57 min (n = 100)。所以在选择摄食速率方面，我们选定摄食5分钟后再连续摄食5个饵料的速度。其次，通过HiSpec color高速摄像机记录摄食过程中各摄食器官的微细变化，如吻部的摄食前后变化。活卤虫投喂密度为5 ind/L，试验拍摄时间为(8:00~10 am, 15:00~17:00 pm)。当试验海马进入试验缸后，开始追逐饵料，记为摄食开始。当海马游泳速度明显减慢，且对饵料的再刺激几乎不反应，记为摄食停止，此时，海马大部分都缠绕在附着物上。

试验二 海马对不同饵料种类的选择性试验

通过试验一，选取与最适活卤虫(8440 ± 114.1 µm)规格相似的冰鲜糠虾(8160 ± 151.6 µm)，比较活卤虫和冰鲜糠虾对海马摄食行为的影响。观察海马摄食活卤虫方法同试验一。观察海马对冰鲜糠虾摄食行为时，在试验缸中设定摄食区(直径Ø = 10 cm的培养皿)和非摄食区，投喂时，用一根中空的透明玻璃管将冰鲜糠虾送到摄食区内，当海马进入摄食区内即记为海马摄食开始。当海马离开摄食区，且对饵料再刺激不反应，记为摄食停止。试验拍摄方法同试验一。

反应时间Reaction time (s)：从投饵开始，至海马摄食相关行为出现为止(一般通过鳍的摆动游向饵料方向；调整头部位置；眼球开始盯准目标)。

反应速度Reaction rate (m/s)：在反应时间内，海马的运动速度。

摄食速率：从摄食5分钟后开始计数，计算再连续摄食5个相应饵料的平均速率。

相对摄食量Food intake (%)：从摄食开始到摄食结束期间，摄食饵料总克数占大海马体重百分比。

活体卤虫：试验海马开始追逐饵料记为摄食开始。当大海马游泳速度明显减慢或依附在附着物上，且再次投喂饵料几乎没有响应，记为摄食停止。

冰鲜糠虾：试验海马进入摄食区域记为摄食开始。当海马离开摄食区域，且再次投喂饵料几乎没有响应，记为摄食停止。

吻管摄食前直径：通过测量，正常游泳状态下的吻管宽度。

吻管最大临界直径：在海马摄食过程中，海马会根据摄食情况，在适宜范围内适时调整吻部直径，来达到摄食的目的，记摄食过程中，吻管宽度最大时，为其摄食时的最大临界直径。

攻击距离：即海马吻部开始攻击饵料的最短距离。海马在发现目标后，眼部会一直紧随猎物，直到与猎物保持一定短的距离后，吻部会突然出击，捕获猎物，定义与猎物保持的最短距离为攻击距离。

试验拍摄视频先通过Corel VideoStudio Pro X5进行前期处理，之后用EthoVision XT 10进行海马摄食行为学分析，使用Excel记录相关数据。采用SPSS13.0软件对数据进行单因素方差分析(One-Way ANOVA)和双因素方差分析(Two-Way ANOVA)，若差异存在则进行Duncan’s多重比较检验组间差异。p < 0.05作为差异显著标准，p < 0.01作为差异极显著标准。

如 图1 所示，在A、B、C三种单一不同规格的饵料情况下，海马对饵料的敏感性存在显著差异(p < 0.05)，且对C组最为敏感，其次是B组，再次是A组。在四种混合组情况下，B + C组敏感性显著高于其他三混合组(p < 0.05)，A + C组和其他两混合组也存在显著差异(p < 0.05)。从整体来看，B + C组敏感性最高，A组敏感性最差。

如 表2 ，显示了不同饵料规格对海马摄食行为参数的影响。从摄食速率角度，各组之间存在显著差异(p < 0.05)饵料规格小，摄食速率较快。同时，单一的饵料组的摄食速率要快于混合饵料组。在摄食量上，各组之间差异显著(p < 0.05)。C组摄食量显著高于其他各组(p < 0.05)，单一的饵料组的摄食量要高于混合饵料组，且随着饵料的规格增大，摄食量增大。在摄食成功率上，A组也显著高于其他各组(p < 0.05)，随着饵料规格的增大，摄食成功率有所降低，混合饵料组对海马的摄食也产生一定干扰。

在摄食过程中，海马对活卤虫的刺激比较敏感。饵料投喂后，会主动追捕，连续摄食，饱食后会依附在附着物上休息。在摄食冰鲜糠虾过程中，饵料投喂后，会主动追捕摄食，在饵料下沉期，摄食较活跃，饵料沉底后，活跃度相对减弱，且对沉底的饵料的品质选择性较强，一般残缺的饵料不会被摄食，摄食的糠虾大部分为与海马口径相似且个体外观必定完整。

表3 显示，海马对活卤虫的反应时间11.03 ± 1.21 s要显著地快于冰鲜糠虾(p < 0.05)，且约为其3倍左右。同时，在运动速度上，海马对活卤虫的反应速度也是显著高于冰鲜糠虾(p < 0.05)，约为其2倍左右。

表4 表示不同种类饵料对大海马摄食行为参数的影响情况，从摄食速度角度，活卤虫约为0.058 ± 0.007 ind/s，冰鲜糠虾约为0.035 ± 0.001 ind/s，二者之间存在显著差异(p < 0.05)。在摄食量、摄食成功率方面，二者之间也存在显著差异(p < 0.05)。

图2 为海马摄食活卤虫时吻的变化情况。海马发现饵料时，会排空吻内气体，使内部达到一种接近于真空状态，从而在摄食时，吻部吸力能达到最大。这时吻部直径最小为Ø = 1.9 mm。摄食准备工作完成后，吻部一般有两次明显扩张，首先，进行第一次扩张，较迅速，约用时57.7 ± 2.37 ms，这时吻的直径可达到Ø = 2.5 mm，第一次吻部扩张到第二次扩张几乎是一瞬间，时间间隔约为19.2 ± 0.93 ms，第二次扩张直径达到Ø = 2.9 mm，吻部扩张到最大，这时，饵料已被成功摄食进入吻管，由于饵料需要在吻管停留片刻，海马的吻管的直径这时一般保持最大状态，约持续119.1 ± 5.65 ms。饵料被处理吞咽后，吻部直径恢复到正常状态下，约用203.9 ± 18.73 ms。之后，进入下一个饵料的搜寻、追捕、摄食过程。

图3 显示，海马在摄食冰鲜糠虾时，吻的微细变化情况和摄食活卤虫类似，也要经过吻管收缩–第一次扩张–第二次扩张–吻管保持最大直径–吻管收缩至最小。吻管最小直径约为Ø = 1.9 mm，完成第一次扩张大概19.3 ± 0.23 ms，吻管直径达到Ø = 2.1 mm。完成第二次扩张需19.2 ± 0.61 ms，吻管直径达到Ø = 2.8 mm。最大吻管直径约持续403.9 ± 15.37 ms，从最大直径收缩至最小直径约153.8 ± 12.91 ms。